原發(fā)性肝癌是最常見的惡性腫瘤之一,目前在世界范圍內(nèi)發(fā)病率呈上升趨勢。近年來全球肝癌每年新發(fā)病例50-60 萬,其中約 50%發(fā)生在我國。目前,肝癌在我國居惡性腫瘤死亡率的第二位。
肝癌發(fā)病原因是由病毒、化學(xué)致癌物、放射性物質(zhì)等諸多因素引起肝細(xì)胞生長失控,以及與癌基因、抑癌基因調(diào)控和表達(dá)關(guān)系密切,肝癌的發(fā)生、發(fā)展的致病機(jī)理目前研究仍不清楚,也尚未有效的治療方法,因此選擇合適的肝癌動物模型,闡明肝癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)理以及研發(fā)新的藥物具有重要的意義。
小鼠肝癌動物模型現(xiàn)主要有化學(xué)誘導(dǎo)性、移植性、轉(zhuǎn)基因等方法。移植性小鼠肝癌模型的優(yōu)點(diǎn)是飼養(yǎng)方便,操作簡單,適用較大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)。移植方式主要包括同種移植和異種移植。那么如何在目標(biāo)位置上移植腫瘤細(xì)胞呢?
今天小編分享2019年發(fā)表在Theranostics雜志上的一篇文章(點(diǎn)擊文末“閱讀原文”可直達(dá)),利用這篇文章的實(shí)驗(yàn)過程給大家介紹如何通過超聲圖像引導(dǎo)注射裝置,將N1-S1細(xì)胞注射到肝臟左葉包膜下,建立肝癌模型。
圖1. N1-S1細(xì)胞目標(biāo)注射位置(綠色)
試驗(yàn)方法
使用高頻小動物超聲成像系統(tǒng)Vevo?2100(VisualSonics; Toronto, Ontario, Canada),40MHz超聲探頭,在SD大鼠腹部找到肝左葉,使用該系統(tǒng)配有的超聲圖像引導(dǎo)注射裝置,找到注射針頭進(jìn)入最佳位置,1X10e6 N1-S1細(xì)胞重懸在50μL Matrigel里,將細(xì)胞懸液注射到肝臟左葉的包膜下。
圖2.?Vevo圖像引導(dǎo)注射裝置
圖3. A:肝臟超聲(顯示:皮膚、肌肉、肝臟);B:調(diào)整注射針位置(X、Y、Z),將針穿過皮膚、腹壁和肝臟,到達(dá)肝臟左葉的包膜下;C:注射N1-S1細(xì)胞懸液;D:注射后細(xì)胞的超聲圖像
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
成功建立肝臟原位腫瘤模型,建模構(gòu)建2周后,通過肝動脈導(dǎo)管注射放射性核素188Re-MS,使用SPECT/CT可以觀察到接種原位腫瘤的存在。
圖4. SPECT/CT下觀測腫瘤細(xì)胞的生長
小結(jié)
利用Vevo圖像引導(dǎo)注射技術(shù),可以由超聲B模式提供結(jié)構(gòu)信息,同時觀測注射器針尖所到的位置;注射支架系統(tǒng)可以幫助我們穩(wěn)定注射器,微調(diào)注射器位置,以最精準(zhǔn)的方式對目標(biāo)位置進(jìn)行注射操作,尤其適合腫瘤模型(原位瘤、轉(zhuǎn)移瘤)的建立、各臟器精確給藥等的研究。